山楂中黄酮类化合物的测定方法概述 (12)(三)

山楂中黄酮类化合物的测定方法概述 (12)(三)

山楂中黄酮类化合物的测定方法概述

通过系列上述实验及验证证明紫外分光光度法对山楂中黄酮类化合物的测定具有稳定性好，精密度、准确度符合要求，且方法简便、快捷。

（二）高效液相色谱法测定：

仲英2、陈新建2等人通过高效液相色谱法对山楂黄酮的牡荆素进行的含量测定的方法

1、实验方法

①对照品溶液制备精密称取5.91mg牡荆素，置于50ml容量瓶中加流动相使溶解并稀释至刻度、摇匀。作为对照品溶液，每1ml含牡荆素0.1182mg

②供试品溶液制备取山楂总黄酮200mg，精密称重，置于250ml容量瓶中，加入甲醇和盐酸150ml，水浴加热40min，放冷至室温，残渣加流动相溶解，移入200ml容量瓶，稀释至刻度，摇匀。作为供试品溶液

③测定最大吸收波长取对照品溶液，用流动相稀释后，测得牡荆素最大吸收波长为270nm，选用270nm作为检测波长

④色谱条件柱温为室温，设置流动相参数

⑤绘制标准曲线准确吸取对照品溶液，按色谱条件进行测定以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，将实验数值代入回归方程牡荆素在实验范围内与峰面积呈良好的线性关系。

⑥精密度实验准确吸取对照品溶液，重复进样6次，6次测得峰面积RSD=0.66% 证明本实验精密度高。

⑦重复性实验按上述方法重复本实验，计算供试品牡荆素含量和相对标准差为3.66%，证明本实验重复性相当好。

⑧加样回收实验采用加样回收法，按上述方法进行含量测定，并计算回收率为99.09%

2、实验结果与结论上述实验结果：6次平均加样回收率99.09%，RSD=3.76% 重现性实验的RSD=3.66%(6次) 实验结论：高效液相色谱法为山楂黄酮提供了准确、灵敏的含量测定方法。

（三）毛细管电泳法测定

张玉3孙磊3等人的毛细管电泳技术在天然黄酮类化合物测定中的应用

毛细管电泳法是20世纪80年代问世的一种高效液相分离技术，被认为是当代分析科学最具活力的前沿研究课题。具有分离效率高，进样量体积小，分析对象广、多模式的特点。实际测定效果分辨率和灵敏度高，重复性好，易于实现全程自动化等优点。

1、实验条件毛细管电泳法分析检测山楂黄酮类化合物的条件为：50mmol/L的硼酸盐缓冲液，用50%的磷酸调释，PH值为8.15,15%的乙腈作为有机添加剂，毛细管长度50cm，有效长度（进样端至检测窗口）45.5cm,检测波长350nm,毛细管温度25oC,样品仓温度25oC,电压15KV,进样方式:压力进样压力:20psi*s.通过一系列实验对线性范围、精密度及样品测定。

2、实验结果：实验结果表明，毛细管电泳法具有灵敏度高、速度快，进样量少，运行成本低，应用范围广。

四、结语

山楂黄酮是一种心脑血管疾病的有效药物，我国作为盛产山楂的国家，山楂原料来源充足，成本低廉。随着时代的发展，人们对环境和健康越来越重视，对中医药的需求也越来越大，对生产技术水平的要求也会越来高，这也必将反过来促进新方法、新技术的产生。山楂中黄酮类化合物及其他功能成分的测定也在飞速发展，以后也必将会产生更多的新技术、新方法来测定山楂中黄酮类化合物。从而极大提高山楂资源的利用率和产品的附加值。

参考文献：

1、李宏伟、张守勤《不同生长期山楂叶中黄酮类化合物的含量测定》

文库^文档

2、仲英、陈新建《高效液相色谱法对测定山楂叶总黄酮中牡荆素含量》

时珍国医国药2000年第11卷第10期

3、张玉、孙磊《毛细管电泳技术在天然黄酮类物质测定中的应用评述》

化学研究2010年7月第21卷第4期

4、田永利、许志宇《总黄酮类化合物含量的测定方法和药理作用研究进展》

首席医学网2010年8月18日

5、刘文民《山楂中主要活性成分的HPLC及HPCE法分析研究》

学术^文档 2002年6月1日

6、曹会凯《山楂中黄酮类化合物的提取及成分分析》