二、黄酮类化合物的分析和鉴定方法
（一）光度法
光度法的使用简便、快速，需要的仪器设备也比较简单，便于推广应用。光度法目前分为紫外光分度法、荧光光度法和紫外-可见分光光度法等。
1、紫外分光光度法是目前测定山楂黄酮含量应用最广泛的方法，其最大优势是前处理方便、快捷，设备投资价格低廉，费用低，使用操作简单、快捷。其原理是黄酮类化合物的C6-C3-C6结构，可以看成苯甲酰和肉桂酰组成。其中肉桂酰基团使黄酮类化合物在320nm-380nm有吸收峰，苯甲酰基团使黄酮化合物在240nm-280nm有吸收峰。但由于测定是混合体系的药物含量，未经分离纯化的样品，容易受到其他成分的干扰，测定的误差相对较大，而且，在测定时检测液中一般要加入NaNo2，毒性较大。
2、荧光光度法的灵敏度，相对于其他光度法要高很多。
3、紫外-可见分光光度法的最大优势就是能够有效消除吸收峰不对称给定量分析造成的影响，提高定量分析的准确度。
（二）毛细管电泳法
毛细管电泳法是近几年发展起来的一项新的分离技术，目前在药物分析、检测方面得到较为广发的应用，其的特点是高效、高速分析分离。适应性广，检测限低，进样量少，分离速度块，溶剂消耗少，自动化程度高，分析模式多样，使用方便。其原理是离子域和电离子在高压电场的作用下，以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道。通过毛细管，按不同的淌度和分配系数，进行分离和分析。但相对而言，检测设备的价格比较昂贵。
（三）高效液相色谱法
高效液相色谱法又叫高压或高速液相色谱法。其原理是在分离过程中，对柱体施加一定的压力，使得样品能够更快的通过。最大的优势在于准确度高，获取的数据可靠。但分析时间相对比较长，分析效率相对比较低，即便采用梯度洗脱技术也难以将某些成分完全分离。仪器价格比较昂贵，色谱柱容易被污染，而且被污染后难于清洗，使色谱柱使用寿命缩短。
（四）气质联用法
气质联用法被广泛应用于复杂组分尤其是挥发性成分的分离和测定，具有高分辨率和质谱高灵敏度的特点。是定性、定量和结构性鉴定的有效工具。
（五）液质联用法
液质联用法在中药成分分析中已经得到广泛应用，其特点在于中草药中结构复杂、含量低、稳定性差，常规方法难以分析鉴定的成分具有显著的优势，具有高效、快速、灵敏度高，许多样品不需要繁琐和复杂的前处理，只需要进行简单预处理或衍生化即可进行分析。
（六）化学发光法
化学发光法，是一种有效的痕量分析技术，具有灵敏度高，线性范围宽，而且分析快速、重现性好、自动化程度高等特点。
三、山楂中黄酮类化合物测定实例
（一）紫外分光光度法测定：
李宏伟1张守勤1等人不同生长期山楂中黄酮类化合物的含量测定
紫外分光光度法是目前测定山楂黄酮应用最广泛的方法，且操作简单快捷，设备投资成本低廉，费用较低。本文就以该方法对山楂中黄酮类化合物的测定做基本阐述：
1、实验原理 山楂中黄酮类化合物，具有许多重要的生理活性和药效，黄酮类化合物的母核是C6-C3-C6结构，母核中某些位置的C3和C5含有成分能与铝、铅等金属离子形成稳定的络合物，这些络合物能在光谱上产生明显变化。黄酮与金属离子的这种作用，不仅可以用来鉴别这些成分的位置，还可以作为定量分析的基础。
2、实验方法
①对照品溶液制备 精密称取在干燥至恒重的芦丁10mg，用50%乙醇定容至50ml容量瓶中。
②供试品溶液制备取山楂粉末0.5g，准确加入50%乙醇25ml，摇匀，加压400mpa，过滤后的续滤液。
③测定最大吸收波长
④绘制标准曲线，并计算回归方程 精密量取对照品溶液，1,2,3,4,5,6ml溶液，分别置于25ml量瓶，各加水至6ml，加5%亚硝酸钠1ml，10%硝酸铝溶液1ml，4%氢氧化钠溶液10ml，再加水至刻度，摇匀。放置15分钟，用分光光度法，在500nm的波长处，测吸光度。以吸光度为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制标准曲线
⑤样品含量测定精密量取供试品溶液1ml，置于25ml量瓶，加水至6ml，加5%亚硝酸钠1ml，10%硝酸铝溶液1ml，4%氢氧化钠溶液10ml，再加水至刻度，摇匀。放置15分钟，用紫外-可见分光光度法，在500nm的波长处，测吸光度数值。
⑥将实验获取的数值代入回归方程，计算供试品总黄酮的含量
3、实验结果的验证
①稳定性实验，验证供试品溶液在不同时间里吸收度的变化。
②精密度实验，验证供试品溶液在不同时间里精密度的变化。
③回收率实验，通过回收率实验，来验证回收率的重现性。
4、实验结论
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