白花蛇舌草的抗肿瘤研究进展(三)

    在实验中建立荷瘤小鼠肝癌模型,以空白对照组和白花蛇舌草组做比较，空白组以清水灌胃，白花蛇舌草组以白花蛇舌草注射液，每只50 mg·kg-1,肌肉注射，每周1次，共治疗5次。观察各组荷瘤小鼠肿瘤生长情况，采用ELISA法检测血清中多项指标的分泌水平，采用细胞毒实验MTT检测中药白花蛇舌草对肝癌细胞的抑制作用。试验结果表明众多实验中空白对照组、白花蛇舌草组小鼠肝癌的发生率分别为100%、60%[22]。

    实验中在体外培养人肝癌细胞Bel-7402和SK-Hep-1，用不同浓度的复方白花蛇舌草HDWF干预，采用MTT法检测，结果显示复方白花蛇舌草HDWF能够抑制肝癌细胞的增殖,从形态观察和细胞计数等方面显示复方白花蛇舌草HDWF可减少肝癌细胞的密度及细胞数量，能够起到很好的抑制肝癌细胞的集落形成以及促进肝癌细胞凋亡的作用。以上结果表明复方白花蛇舌草HDWF具有抑制肝癌细胞增殖和诱导肝癌细胞凋亡的作用[23].

    在实验中采用基因芯片技术用白花蛇舌草豆甾醇（SHD）对人肝癌细胞S-7721做实验，结果显示由多条靶基因协同，通过胞内外信号转导途径协调完成体外抑制人肝癌细胞S-7721的生长。以上实验表明白花蛇舌草豆甾醇（SHD）对人肝癌细胞S-7721具有显著的体外抑制作用［24］。

（四）大肠癌

实验中以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型，观察白花蛇舌草和仙鹤草用药组对肿瘤生长速度的影响，实验过程中用药组肿瘤生长率小于对照组；免疫组化法及肠道菌群培养技术观察大肠癌裸鼠移植瘤PCNA表达及阳性细胞密度、肿瘤坏死因子和白介素6的表达以及肠道菌群的培养，和相应的对照组对照，在肠道菌群及免疫调节能力上用药组优于对照组，微生态调节剂组优于用药组。以上试验表明白花蛇舌草和仙鹤草在体内能显著抑制大肠癌的生长[25]。

    在实验中建立HT-29皮下移植瘤模型，采用MTT法检测白花蛇舌草（HDW）对HT-29细胞活力的影响，不同浓度的HDW干预可显著降低HT-29细胞活力，呈现一定的剂量依赖；通在实验过程中测量瘤体体积观察HDW对瘤体生长的影响，结果显示HDW明显的抑制HT-29移植瘤瘤体的生长；免疫组化法中经过HDW干预后对移植瘤组织中ki-67表达的影响，结果显示HDW能够下调移植瘤组织中ki-67的表达；采用SP法分析HDW对HT-29细胞干细胞比例的影响，同样的显示出HDW可降低HT-29细胞中干细胞的比例；通过以上试验得出白花蛇舌草（HDW）对大肠癌细胞和大肠癌干细胞的生长具有显著抑制作用［26］。

（五）结肠癌

用白花蛇舌草对人结肠癌细胞HT-29做实验，在实验观察中发现白花蛇舌草对结肠癌细胞HT-29有明显抑制作用，且具有量-效关系；而且对细胞周期也有一定的影响，在G1/S期中发生阻滞的现象，使得S期的比例逐渐下降；RT-PCR结果显示随着给药浓度的增加周期相关基因Cycline、CDK2及P27mrna的表达逐渐降低；以上实验表明白花蛇舌草可抑制结肠癌HT-29细胞的增殖，调节及阻滞结肠癌HT-29细胞的周期进程[27]。

用白花蛇舌草提取物对人结肠癌细胞5-Fu做实验，采用MTT法、RT-PCR法探讨其对人结肠癌细胞5-Fu耐药的作用及其可能作用机制，实验中发现白花蛇舌草提取物在抑制结肠癌细胞HCT-8/5-Fu细胞的活力方面有显著的功效，在干预24、48h后对HCT-8/5-Fu细胞活力影响的IC50分别为4.71和3.28mg/ml，呈现明显的时间剂量依赖关系间依赖作用。实验结果表明它的作用机理可能与下调耐药基因ABCG2的表达有关[28]。

（六）宫颈癌

    实验过程中建立裸鼠人宫颈癌细胞移植模型，采用白花蛇舌草胃内灌药，探究白花蛇舌草对宫颈癌的抑制作用及可能的分子生物学机制。实验过程中白花蛇舌草不但能诱导HeLa细胞凋亡，使Ki-67蛋白的表达下降，还能抑制HeLa细胞移植瘤的生长 ，明显延长荷瘤小鼠的平均生存时间。以上实验得出白花蛇舌草通过直接抑瘤增殖和诱导、促进肿瘤细胞凋亡[29]。 

   在研究中用白花蛇舌草对宫颈癌HeLa细胞做实验，该过程中显示其能使宫颈癌HeLa细胞阻滞于S期，而且可以诱导该细胞凋亡，用流失细胞仪检测发现HeLa细胞G0/G1细胞比例减少，细胞周期结果S期细胞比例增多，以上结果表明白花蛇舌草可能是通过改变HeLa细胞周期分布（S期阻滞）并同时诱导细胞凋亡而达到抗肿瘤作用[30]。

（七）恶性腹水

    采用不同剂量白花蛇舌草注射液和5-氟尿嘧啶(5-FU) 腹腔灌注治疗恶性腹水，观察其治疗恶性腹水的临床疗效。观察结果，白花蛇舌草注射液和5-氟尿嘧啶(5-FU)计量为100ml+1g的疗效好且副作用小。从而得出大剂量白花蛇舌草注射液加常用量5-FU可有效控制腹水增长[31]。

    卵巢癌、胃癌、大肠癌、肝癌，淋巴瘤等多种恶性肿瘤常可引起恶性腹腔积液。用白花蛇舌草联合化疗药物腹腔内灌注治疗恶性腹水，结果显示白花蛇舌草+顺铂组疗效明显优于腹腔单纯灌注顺铂化疗药物[32]。

参考文献

［1］国家药典委员会.中国药典［M］.中国医药科技出版社，2012年10月1日.

［2］唐旭利，刘静，李国强等.不同产地的白花蛇舌草中对香酸含量测定的快速方法［J］.中国现代应用药学杂志，2008年，25（5）：408-410.

［3］CUI J,SHI S S,WANG S C,etal.Recent development of studies on the chenmical constituents and pharmacological functions of 0ldenlandia Diffusa Wild［J］.上海中医药杂志，2005年，39（7）：57-59.

［4］王航，汤承，岳华等。白花蛇舌草超微粉对小鼠免疫功能的影响［J］。中国畜牧兽医，2014，41（3）：166-169.

［5］刘颖，高超，刘永彪。白花蛇舌草对荷瘤鼠脾脏淋巴细胞影响的实验研究［J］。放射免疫学杂志，2006年，19（4）：310-312.

［6］马河，程艳林，张金杰等。白花蛇舌草总多糖的分离纯化、结果鉴定及初步免疫活性分析［J］.中国实验方剂学杂志，2014，20（22）：37-40.

［7］杨俊，许军，刘燕华等，白花蛇舌草抗乙肝病毒化合物体外筛选［J］.时珍国医国药，2013,24（6）：1402-1403.

［8］张翔，周郁鸿，叶宝东等，白花蛇舌草注射液对多发性骨髓瘤细胞株增殖的抑制作用［J］.中医杂志，2013,54（15）：1319-1326.

［9］肖云，伍治平，金从国等，白花蛇舌草提取物抗小鼠结直肠癌血管生成的     实验研究［J］.昆明医科大学学报，2013,34（10）：53-57.

［10］车杭盈.白花蛇舌草注射液诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡的机制研究        ［J］.中西医结合研究，2014,6（1）：20-22.

［11］李剑敏，宋海鹏，姚淑琼等，熊果酸诱导HL-60细胞凋亡及其机制的初探［J］.时珍国医国药，2012，23（12）：3053-3054.

［12］陈晓红，高瑞兰，陈益民等，白花蛇舌草注射液对HL-60细胞凋亡相关基因和蛋白表达的影响［J］，中国中医药科技，2012,19（3）：226-228.

［13］刘志华，何成，白花蛇舌草提取物对乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用［J］.四川生理科学杂志，2012,34（1）：6-8.

［14］叶蓉，林久茂，魏丽慧等，白花蛇舌草提取物对人结肠癌HT-29细胞增殖及Hedgehog信号传导通路表达的影像［J］.海峡科学，2012，,8）：100-102,110.

［15］魏丽慧，林久茂，彭军等，白花蛇舌草乙醇提取物对人结肠癌细胞HT-29Pim-1和Pim-2mRNA表达的影响［J］.世界中西医结合杂志，2011年6（4）：284-287.

［16］于春艳, 李薇, 刘玉和, et al. 白花蛇舌草提取物体外抗肿瘤作用及机制研究[J]. 北华大学学报(自然科学版), 2004, 5(5):412-416.

［17］LING B,DONG Q,SUN W,et al.Evaluating the anticancer activity of hedyotis diffusa water extact against human breast ccancer MCF7 cells［J］.Open Natural Products Journal,2013,6（1）：1-4.

［18］SHAOJ,GONG G,Trombetta L.An Evidence-based Perspective of Hedyotis Diffusa or Oldenlandia Diffusa （Spreading Hedyotis）for Cancer Patients［J］.Evidence-based Anticncer Materian Medica,2011：179-192.

［19］唐立明，汪金华，周洪进，静滴白花蛇舌草注射液治疗中晚期食道癌106例临床观察［J］.海南医学，2003年，14（2）：75-76.

［20］吕昕, 朱渊红, 周林水, et al. 白花蛇舌草乙醇提取物对不同上皮-间质表型的肺腺癌细胞体外作用的研究[J]. 现代实用医学, 2015, 27(2):257-258.

［21］李洁, 李玉基, 李博. 白花蛇舌草抑制Lewis肺癌小鼠自发转移的实验研究[J]. 中医药导报, 2012, 18(9):78-79.

［22］陈晨[1] , 张吉菲[1] , 房鑫[2] . 白花蛇舌草对肝癌的作用机制研究[J]. 河南中医, 2018.

［23］杨弘, 靳祎祎, 林露敏, et al. 复方白花蛇舌草对肝癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 福建中医药, 2018, v.49；No.322(04):66-69.

［24］张硕，王宏韬，石振艳等，应用基因芯片技术研究白花蛇舌草豆甾醇抑制人肝癌细胞体外生长的靶基因调控［J］.现代生物医学进展，2007,7（8）：1181-1183.

［25］李丽秋, 张德慧, 马淑霞, et al. 中草药白花蛇舌草等对实验性大肠癌作用机制的研究[J]. 中国微生态学杂志, 2008, 20(3).

［26］林久茂, 魏丽慧, 李琼瑜, et al. 白花蛇舌草通过调控Wnt/β-catenin通路抑制大肠癌细胞及大肠癌干细胞的生长[J]. 中华中医药杂志, 2015(5):1805-1808

［27］魏丽慧, 林久茂, 彭军, et al. 白花蛇舌草乙醇提取物对人结肠癌细胞HT-29Pim-1和Pim-2mRNA表达的影响[J]. 世界中西医结合杂志, 2011, 06(4).

［28］林久茂，詹友知，魏慧丽等，白花蛇舌草提取物逆转结肠癌细胞5-Fu耐药的作用［J］.福建中医药，2013,44（1）：53-55.

［29］张培影, 王业桥, 徐侠, et al. 白花蛇舌草对裸鼠宫颈癌细胞增殖和凋亡的实验研究[J]. 中国当代医药, 2010, 17(30):5-8.

［30］高超，刘颖，蔡晓敏等，白花蛇舌草对宫颈癌HeLa细胞周期、凋亡及端粒酶活性的影响［J］.徐州医学院学报，2010,30（7）：466-468.

［31］胡淑霞. 不同剂量白花蛇舌草注射液5-FU腹腔灌注治疗恶性腹水68例总结[J]. 湖南中医杂志, 2010, 26(1):9-10.

［32］罗丽莹，张涵英，腹腔灌注白花蛇舌草治疗恶性腹水积液40例临床观察［J］.现代肿瘤医学，2004,12（2）：147-149.