葛根及其制剂中黄酮类化合物的HPLC测定方法概述(一)

目录

一、葛根及其所含的黄酮类成分..............................................2

（一）葛根简介（性状描述、物理特征、药理作用）............................2

（二）葛根所含的黄酮类成分（主要黄酮类成分、异黄酮类成分）................2

二、HPLC测定方法简介.....................................................2

（一）色谱法分类..........................................................3

（二）色谱分离原理........................................................3

1、液固色谱法..........................................................3

2、离子对色谱法........................................................3

3、高效液相色谱法的特点................................................4

三、葛根及其制剂中黄酮类化合物的HPLC测定实例.............................4

（一）葛根提取物中总黄酮含量的测定.......................................4

1、材料和仪器..........................................................4

2、总黄酮含量的测定....................................................4

3、结果分析............................................................5

（二）羌黄颈康丸中的葛根素含量...........................................5

1、仪器与试剂..........................................................5

2、方法................................................................5

3、样品含量测定........................................................6

4、讨论................................................................6

四、参考文献..............................................................6

葛根及其制剂中黄酮类化合物的HPLC测定方法概述

摘要：黄酮类化合物广泛存在于自然界,资源丰富,且具有多种生理活性,是一类广泛受到重视的天然化合物,关于中草药、中药制剂总黄酮测定的方法和文献比较丰富。

一、葛根及其所含的黄酮类成分

（一）葛根简介（性状描述、物理特征、药理作用）

葛根，为豆科植物野葛的干燥根，习称野葛。粗壮藤本，长可达8米，全体被黄色长硬毛，茎基部木质，有粗厚的块状根。花期9-10月，果期11-12月。生于山坡草丛中或路旁及较阴湿的地方，或生于海拔1000-3200米的山沟林中。中国大部地区有产，主要分布于辽宁、河北、河南、山东、安徽、江苏、浙江等。

在中国，葛根有着“千年人参”的美誉；在日本，葛根被誉为“皇室特供食品”。从中医学角度来看，葛根味甘微辛，气清香，性凉，主入脾胃经，有发表解肌，升阳透疹，解热生津之功效，主治外感发热，头项痛强、麻疹透发不畅、温病口渴、消渴、酒毒、胸痹心痛等病症。

葛根能改善冠状动脉循环，总黄酮与葛根素能使冠脉状动脉扩张，阻力下降，冠状动脉血流量增加，总黄酮还能对抗垂体后叶素引起的冠状动脉痉挛，降低心肌耗氧量；葛根并能抗心律失常。葛根总黄酮能使麻醉犬脑血管明显扩张，阻力下降，血流量增加，并有剂量相关性，但作用不及罂粟碱。

葛根素对正常脑微循环或局部用去甲肾上腺素引起的脑微循环障碍均有明显改善作用，主要表现为增加微血管运动振幅，提高局部微血管流量。葛根煎剂、浸剂和总黄酮都有一定降压作用。葛根是一种有效的肾上腺素受体阻滞剂，此作用是其降压和抗快速心律失常的机制之一。葛根煎剂及葛根素有降血糖作用。

葛根所含异黄酮类化合物有降血脂作用。葛根素还有抗血小板聚集作用。葛根有解热作用，乙醇浸剂较煎剂解热作用为强。葛根含有收缩和舒张平滑肌的成分，因此对肠平滑肌有时呈收缩作用，有时呈松弛作用。葛根水煎剂对痢疾杆菌有抑制作用。葛根有益智作用，对东莨菪碱、乙醇或二氧化碳所致学习记忆障碍有明显保护作用。

(二)葛根所含的黄酮类成分（主要黄酮类成分、异黄酮类成分）              葛根主要成分为异黄酮类化合物：大豆素、大豆皂、葡萄糖苷、葛根素。

二、HPLC测定方法简介

高效液相色谱以经典的液相色谱为基础，是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂（ 硅胶、氧化铝等）。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大，传质扩散慢，因而柱效低，分离能力差，只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用的固定相粒度小（5um-10um）、传质快、柱效高。

（一）色谱法分类

按两相的物理状态可分为：气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。气相色谱法适用于分离挥发性化合物。GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC)，其中以GLC应用最广。液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。LC 同样可分为液固色谱法(LSC)和液液色谱法(LLC)。此外还有超临界流体色谱法(SFC)，它以超临界流体（界于气体和液体之间的一种物相）为流动相（常用CO2），因其扩散系数大，能很快达到平衡，故分析时间短，特别适用于手性化合物的拆分。

按原理分为吸附色谱法(AC)、分配色谱法(DC)、离子交换色谱法(IEC)、排阻色谱法(EC，又称分子筛、凝胶过滤(GFC)、凝胶渗透色谱法(GPC）和亲和色谱法，此外还有电泳。按操作形式可分为纸色谱法(PC)、薄层色谱法(TLC)、柱色谱法。

（二）色谱分离原理