产PHA地衣细菌的多样性分析

摘要：目的： PHA即聚羟基烷酸，其具有独特的生物可完全降解性、生物相容性等特性，具有良好的生物前景，为人类进一步提取与利用PHA提供了理论依据。主要探查产PHA地衣细菌的多样性。实验方法：通过使用尼罗蓝初筛以及苏丹黑染液复筛的方法对产PHA地衣细菌进行分离、筛选和鉴定。实验过程：对新疆地区采集的地衣样品进行增菌分离培养,分离出产PHA耐旱固氮菌株，后经过尼罗蓝荧光初筛与苏丹黑染色复筛，筛选PHA高产菌株，最终通过进一步DNA提取鉴定，分析菌种的多样性。主要结果：在新疆地区采集的地衣样品中，成功分离筛选出13株高产PHA的菌体，并通过序列比对鉴定确定其中有6株属于芽孢杆菌属，6株属于变形菌属，1株属于放线菌属。

关键词  地衣；固氮；分离；筛选；鉴定；PHA

中图分类号：Q93-331

Diversity of lichens producing endophytes PHA

Abstract: Goal:PHA named Polyhydroxyalkanoates...

Key word: Lichens; nitrogen fixation; separation; screening; identification; PHA

目  录

摘要…………………………………………………………………………………………1

英文摘要……………………………………………………………………………………1

引言…………………………………………………………………………………………2

正文…………………………………………………………………………………………2

一、实验材料与方法步骤 …………………………………………………………………2

（一）材料…………………………………………………………………………………2

（二）培养基和试剂………………………………………………………………………2

（三）仪器设备……………………………………………………………………………4

（四）操作步骤……………………………………………………………………………4

1.样品处理  ………………………………………………………………………………4

2.富集培养…………………………………………………………………………………4

3.初步鉴定（初筛）………………………………………………………………………4

4.再次鉴定（复筛）………………………………………………………………………4

5.发酵培养…………………………………………………………………………………4

  6. PHA提取………………………………………………………………………………5

7.菌种鉴定…………………………………………………………………………………6

二、结果 ……………………………………………………………………………………7

（一）分离纯化结果………………………………………………………………………7

（二）菌落初筛形态………………………………………………………………………7

（三）复筛菌体形态………………………………………………………………………8

 （四）PHA提取…………………………………………………………………………… 9

（五）菌种鉴定 …………………………………………………………………………10

三、讨论 ……………………………………………………………………………………13

（一）检出材料、污染原因及处理方法…………………………………………………13

（二）试验中出现的异常现象及其分析…………………………………………………14

现象1………………………………………………………………………………………14

现象2………………………………………………………………………………………14

现象3………………………………………………………………………………………14

参考文献……………………………………………………………………………………15

致谢…………………………………………………………………………………………16